前言 電泳技術(shù)的發(fā)展集中在幾個(gè)熱點(diǎn)領(lǐng)域，**近發(fā)展較快，應(yīng)用廣泛的電泳包括毛細(xì)管

電泳、蛋 白雙向電泳、脈沖場(chǎng)電泳等。電泳技術(shù)在醫(yī)療、生化方面的應(yīng)用同時(shí)也帶動(dòng)了相關(guān)儀器設(shè)備 的發(fā)展，如質(zhì)譜、凝膠成像等。雖然只是生化分離分析所必需的常規(guī)儀器，但與其它大型儀 器設(shè)備一樣，電泳系統(tǒng)的進(jìn)展同樣是非常迅速的。由于電泳與其它分離技術(shù)相比具有分辨 率高， 所需設(shè)備技術(shù)要求比較簡(jiǎn)單， 操作條件溫和等優(yōu)點(diǎn)， 所以被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、 醫(yī)學(xué)、 等領(lǐng)域中，在生化分離制備中常被用作分離步驟的**后一步?？v觀電泳技術(shù)領(lǐng)域，技術(shù)發(fā)展 的重心是應(yīng)用電泳的原理并根據(jù)不同分離目的和分離要求以及被分離物質(zhì)的不同特性設(shè)計(jì) 出簡(jiǎn)便、靈敏度高的電泳系統(tǒng)。從 1937 年電泳技術(shù)誕生到現(xiàn)在，經(jīng)過(guò)不斷的研究和改 進(jìn)，已經(jīng)有許多種不同類型的電泳方法應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、生化分析、教學(xué)科研領(lǐng)域。實(shí)際應(yīng) 用過(guò)程中也不斷出現(xiàn)新的要求促使電泳設(shè)備廠商不斷改進(jìn)設(shè)計(jì)和研發(fā)新產(chǎn)品， 以滿足市場(chǎng)需 求。  2 電泳技術(shù)的進(jìn)展  

2.1 毛細(xì)管電泳 

 毛細(xì)管電泳是 20 世紀(jì) 80 年代后期分析化學(xué)， 特別是生物分析化學(xué)的重大研究進(jìn)展， 也是目 前發(fā)展**為迅速的電泳分離手段之一，又稱“高效毛細(xì)管電泳（HPCE），它是以高壓電場(chǎng) ” 為驅(qū)動(dòng)力， 以毛細(xì)管為分離通道， 依據(jù)試樣中各組分間遷移率和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分 離的一類分離技術(shù)。與傳統(tǒng)的分離方法相比，毛細(xì)管電泳的顯著特點(diǎn)是高效、快速和微量， 一般上樣量?jī)H幾 nL。 這一點(diǎn)對(duì)于以分析為目的的電泳實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)， 優(yōu)勢(shì)是不言而喻的。 此外， 毛細(xì)管電泳還具備了經(jīng)濟(jì)、清潔、易于自動(dòng)化、一機(jī)多用和環(huán)境污染少等優(yōu)點(diǎn)。  

2.2 雙向蛋白電泳  

**近興起的生物學(xué)分支—系統(tǒng)生物學(xué)是以系統(tǒng)化的觀點(diǎn)研究基因組和蛋白質(zhì)組內(nèi)各成員間 相互作用對(duì)生物體各部分功能的聯(lián)系和影響， 雙向電泳與質(zhì)譜的聯(lián)用是經(jīng)典的也是目前**有 效的研究方法。 雙向凝膠電泳主要用于分離細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)， 是目前蛋白質(zhì)組學(xué)研究的首要 分離分析手段。其基本原理是蛋白質(zhì)首先根據(jù)其等電點(diǎn)在 pH 梯度膠中等電聚焦（IEF） ，然 后按照分子量大小在 SDS-PAGE 中進(jìn)行第二向分離。  3 電泳技術(shù)的應(yīng)用  

3.1 醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用 采用 HPCE 分析血清蛋白質(zhì)獲得的結(jié)果穩(wěn)定，并能準(zhǔn)確計(jì)算

各蛋白質(zhì)的相對(duì)濃度，避免了凝 膠電泳法染色、脫色過(guò)程中多種影響因素造成的誤差，而且 HPCE 法的結(jié)果重復(fù)性好，可信 度高， 便于貯存和檢索。 前白蛋白在血清中的濃度可以表明營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)， 而且是確定惡性腫瘤、 炎癥、肝硬化、何杰金氏病的重要指標(biāo)，多數(shù)電泳法難以分辨，而用 HPCE 法很容易分離定 量，檢測(cè)波長(zhǎng)為 214 或 200nm。毛細(xì)管電泳（CE）增加了白蛋白部分的分辨率，這使得對(duì) 雙白蛋白血癥檢測(cè)的靈敏度有了很大的提高。HPCE 與 PCR 聯(lián)用可以用來(lái)對(duì)傳染性疾病、腫 瘤和遺傳病進(jìn)行分子生物學(xué)的診斷。以毛細(xì)管凝膠電泳分離血液中 HIV-1 的 PCR 產(chǎn)物，并采 用紫外光和熒光檢測(cè)， 是應(yīng)用較早的 PCR 產(chǎn)物的 HPCE 分析。 采用激光誘導(dǎo)熒光的檢測(cè)方法， 可以對(duì) HIV-1 的 DNA 或 cDNA 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行定量分析。激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法（LIF）是目前毛 細(xì)管電泳中**靈敏的一種檢測(cè)方法，其靈敏度可高達(dá) l0-12~l0-15mol·L-1，熒光檢測(cè)器的缺 點(diǎn)是僅能用于有天然熒光或易于用熒光試劑標(biāo)記或染色的物質(zhì)的檢測(cè)， 而且檢測(cè)器的價(jià)格也 較高。但由于 LIF 的高靈敏度和高選擇性，它仍是毛細(xì)管電泳中不可缺少的檢測(cè)方式。在一 些惡性腫瘤疾病中， RNA 轉(zhuǎn)錄后發(fā)生修飾作用的核苷水平升高， 可以用來(lái)對(duì)腫瘤的產(chǎn)生進(jìn)行 標(biāo)記。利用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜可以對(duì)甲狀腺癌病人尿液中 15 種被修飾的核苷進(jìn)行標(biāo)記， 在對(duì)患白血病的兒童和患乳腺癌的婦女進(jìn)行的臨床研究中， 毛細(xì)管電泳脫機(jī)與質(zhì)譜聯(lián)用鑒定 患者的核苷標(biāo)記收到了較好的效果。 毛細(xì)管電泳可簡(jiǎn)便快速分析生物樣品中各種形式的藥物 成分，在藥理學(xué)研究，法醫(yī)學(xué)檢查及臨床毒理等方面也有廣泛應(yīng)用。如：抗白血病藥物胞嘧 啶-β-D-阿拉伯糖苷，經(jīng)簡(jiǎn)單有機(jī)溶劑提取樣品，檢測(cè)限為 8μmol/L；應(yīng)用膠束電動(dòng)毛細(xì)管 電泳 （MECC） 可監(jiān)測(cè)類抗高血壓藥物， 在分離液中加入 SDS 和γ-環(huán)糊精， 經(jīng)有機(jī)溶劑提取， **低檢測(cè)限為 10μg/L，在臨床常規(guī)用藥的檢測(cè)方面，如抗生素類藥物阿莫西林可以不需進(jìn) 行樣品的前處理，直接以血漿樣品進(jìn)樣，但緩沖液中加入 SDS 可減少蛋白的管壁吸附；有的 藥物分析用 MECC 可直接分離，不必特殊處理。如平滑肌解痙藥（Flavoxate）能緩解泌尿結(jié) 石患者的疼痛，取患者尿液作 MECC 測(cè)定，檢測(cè)限可達(dá) 200μg/L。止喘藥為治療哮喘，早產(chǎn) 兒窒息的常用藥，取血清，唾液和尿液樣品，直接進(jìn)樣后進(jìn)行多波長(zhǎng)測(cè)定，其線性范圍為 0~200μmol/L，濃度在 5~110μmol/L 范圍時(shí)有較好的精確度。催眠鎮(zhèn)靜類藥物臨床應(yīng)用范 圍廣，品種多，易發(fā)生藥物依賴性，且中毒劑量與治療劑量接近。如需進(jìn)行藥物濃度監(jiān)測(cè)， **低檢測(cè)限可達(dá) ng/L。此外，一些重要的蛋白電泳臨床化驗(yàn)項(xiàng)目如：同工酶測(cè)定、尿蛋白 測(cè)定等，自動(dòng)化要求很高，全自動(dòng)電泳分析儀應(yīng)運(yùn)而生。  

從歷史的角度來(lái)說(shuō)， 實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段的發(fā)展因?yàn)橥黄屏酥萍s研究工作的瓶頸， 往往能夠給科研 工作帶來(lái)巨大的推動(dòng)作用， 所以電泳技術(shù)的發(fā)展必將能夠加速醫(yī)療、 生化等領(lǐng)域的技術(shù)進(jìn)步， 帶動(dòng)國(guó)民經(jīng)濟(jì)向高技術(shù)方向的轉(zhuǎn)變。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#