電泳依賴于基本過程 - 在電場中移動(dòng)的粒子，或多或少。雖然已知200多年，這種現(xiàn)象仍然驅(qū)動(dòng)許多實(shí)驗(yàn)室的基本技術(shù)。盡管有著悠久的歷史，這一領(lǐng)域仍然圍繞著時(shí)間。但是，不是幾個(gè)世紀(jì)，研究人員現(xiàn)在專注于分鐘。特別地，他們希望該過程花費(fèi)更少的時(shí)間 - 更少。另一方面，每個(gè)人都希望更高的精確度和更低的檢測限，都具有更高的吞吐量。
當(dāng)被問及當(dāng)前凝膠電泳的**大挑戰(zhàn)時(shí)，Life Technologies（加利福尼亞州卡爾斯巴德）的**產(chǎn)品經(jīng)理Nikita Warner快速說，“獲得成果的時(shí)間。“她指出，凝膠上運(yùn)行的核酸在約十年前從45分鐘加速到30分鐘，然后下降到僅10分鐘。“使用實(shí)時(shí)可視化，您可以在看到樂隊(duì)后立即停止運(yùn)行，而且可以少于10分鐘，”她說。
凝膠電泳的長期歷史在該技術(shù)的廣泛使用中發(fā)揮一些作用。明尼蘇達(dá)大學(xué)化學(xué)工程和材料科學(xué)副教授Kevin Dorfman博士指出，用于DNA分離的凝膠電泳是“相當(dāng)成熟的技術(shù)”。他說：“只要你的分離是足夠好，你可以切出樂隊(duì)。“這真的很簡單，只需要拿一把手術(shù)刀，然后逐字切除感興趣的樂隊(duì)。然而，技術(shù)的進(jìn)步可以改善這種形式的電泳。例如，Dorfman指出，用于凝膠的一些市售緩沖液不像傳統(tǒng)的那樣加熱，并且加速了分離。
老和新
Life Technologies以色列業(yè)務(wù)和產(chǎn)品開發(fā)**經(jīng)理Adam Sartiel說，雖然人們已經(jīng)被編程為數(shù)字化觀看這些天，但電泳仍然相當(dāng)古老，因?yàn)樗峁┝吮仨氜D(zhuǎn)換為數(shù)字格式的模擬結(jié)果。 “即使平臺提供了數(shù)字輸出，用戶仍然希望看到頻段 - 數(shù)據(jù)的模擬版本。經(jīng)驗(yàn)豐富的研究人員可能會發(fā)現(xiàn)模擬信息有幫助，特別是在任何故障排除中。
使用電泳的老學(xué)校實(shí)際上是在運(yùn)行任何凝膠之前開始的。它從開始。“大多數(shù)人仍然使用手動(dòng)方法準(zhǔn)備凝膠，”Sartiel說，“這不是精確的，不是一個(gè)校準(zhǔn)系統(tǒng)。
除了一致性，安全性也在制備凝膠中起作用。關(guān)于聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE），華納指出處理有毒化學(xué)品的危險(xiǎn)。“用瓊脂糖凝膠，”她補(bǔ)充說，“個(gè)人的危害不是很大。
因此，Life Technologies專家看到更多的人轉(zhuǎn)向商業(yè)制備的凝膠。Warner說，除了為用戶提供更一致，更安全的產(chǎn)品外，他們的凝膠還提供了更長的保質(zhì)期。“當(dāng)你為PAGE制作自己的凝膠時(shí)，它們**多只能持續(xù)幾個(gè)小時(shí)，”她說。作為一個(gè)例子，她指出NuPAGE凝膠具有一年以上的保質(zhì)期或更長。
舊技術(shù)的新用途
一些新技術(shù)增加了凝膠電泳的使用，而下一代測序提供了一個(gè)關(guān)鍵的例子。Sartiel說：“一些測序系統(tǒng)需要從凝膠中提取一定大小的文庫，現(xiàn)在可以通過凝膠電泳快速自動(dòng)完成。
電泳中的變化，例如毛細(xì)管電泳，也影響潛在的應(yīng)用。正如Beckman Coulter（美國加利福尼亞州）毛細(xì)管電泳全球經(jīng)理Mark Lies博士說：“分離形式可以控制毛細(xì)管內(nèi)的環(huán)境，使您可以完全背對背分離不同類型的分子使用不同的測定。
根據(jù)Lies，毛細(xì)管電泳可以應(yīng)用于解決許多問題。“它可以用于評估蛋白質(zhì)的純度和電荷異質(zhì)性或分析與這些蛋白質(zhì)相關(guān)的碳水化合物，”他說。還指出，毛細(xì)管電泳可用于分析樣品中的離子群體或?qū)τ钞悩?gòu)體彼此分離。他補(bǔ)充說，“在生物制藥行業(yè)中，毛細(xì)管電泳的應(yīng)用非常廣泛，可用于治療性蛋白質(zhì)的自動(dòng)化定量表征。生物科技公司正在指望[毛細(xì)管電泳]技術(shù)，以幫助保持其開發(fā)和商業(yè)化的單克隆抗體治療的質(zhì)量控制。“他還認(rèn)為這種技術(shù)用于石油化工，環(huán)境，食品和飲料，
如果研究人員想要定量精確地鑒定DNA混合物的組分，Dorfman建議使用毛細(xì)管電泳。另一方面，他提到研究人員可以建立凝膠電泳，投資小得多。
增強(qiáng)自動(dòng)化
“毛細(xì)管電泳提供了自動(dòng)化分析，因此用戶變異性**小化，”Lies說。“此外，集成軟件和電子技術(shù)控制提供精確的儀器控制，數(shù)據(jù)量化，以及符合法規(guī)要求的能力。
除了降低可變性的明顯優(yōu)點(diǎn)之外，自動(dòng)化操作提供了方法開發(fā)能力，其中用戶可以對儀器進(jìn)行編程以改變分離條件。“集成軟件可以讓您控制儀器，”Lies解釋說。例如，他說：“施加電壓以產(chǎn)生場強(qiáng)和分離溫度可能影響分離。
甚**可以在毛細(xì)管電泳平臺的前端添加樣品制備平臺。“然后你獲得了運(yùn)行到運(yùn)行的可重復(fù)性，因?yàn)樵跇悠分苽溥^程中也有**小的手動(dòng)交互。
總體而言，毛細(xì)管電泳的增長能力為用戶提供了更高的分離選擇，具有高精度，準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。因此，該技術(shù)將開始應(yīng)用于越來越多的領(lǐng)域中的更多類型的分析。此外，這個(gè)百年古老的概念和全新技術(shù)的組件的改進(jìn)推動(dòng)了這一領(lǐng)域的發(fā)展。
