您是否想知道科學(xué)家如何研究像您的DNA這樣的微小片段？一種方法是凝膠電泳。電泳通常會(huì)產(chǎn)生清晰易讀的條帶，非常適合科學(xué)解釋，但涂片結(jié)果有時(shí)會(huì)掩蓋數(shù)據(jù)。
凝膠電泳使科學(xué)家能夠可視化消化的樣品并測(cè)量片段的大小。涂抹不當(dāng)是由于瓊脂糖凝膠制備不當(dāng)，未稀釋樣品裝入孔中或使用劣質(zhì)樣品造成的。
凝膠電泳是科學(xué)家可視化小分子（例如DNA）的消化樣品并估算這些片段大小的一種方法。為了進(jìn)行電泳，科學(xué)家通過將瓊脂糖懸浮在沸水中來制備凝膠。所得的聚合反應(yīng)產(chǎn)生了縱橫交錯(cuò)的糖聚合物，因此該凝膠在化學(xué)層面上看起來有點(diǎn)像蜘蛛網(wǎng)。
科學(xué)家使用切割儀器在凝膠中形成孔，這樣他們就可以將非常少量的消化樣品加載到孔中。開啟機(jī)器會(huì)使電能流過凝膠，并且樣品中的碎片開始從孔中行進(jìn)到凝膠的另一側(cè)。由于凝膠是網(wǎng)狀的，較小的碎片會(huì)快速穿過基質(zhì)，而較大的碎片則需要更長(zhǎng)的時(shí)間才能穿過基質(zhì)。完成后，凝膠中的黑帶代表不同片段的傳播距離。科學(xué)家測(cè)量這些條帶，并使用對(duì)數(shù)計(jì)算，根據(jù)其遷移的距離確定每個(gè)碎片的大小。
科學(xué)家希望有清晰的條帶，但有時(shí)條帶會(huì)涂片。這種涂抹通常是由于凝膠制備不良，未稀釋的樣品上樣至孔中或質(zhì)量較差的樣品所致。
當(dāng)涉及涂抹結(jié)果時(shí)，一個(gè)可能的罪魁禍?zhǔn)资菧?zhǔn)備不充分的凝膠。令人滿意的凝膠均勻聚合，在流延盤中的整個(gè)凝膠中產(chǎn)生均勻的基質(zhì)。如果一部分凝膠（通常是下半部分）在科學(xué)家完成整個(gè)托盤傾倒之前凝固，則生成的凝膠將不均勻并產(chǎn)生涂抹的結(jié)果。
在將樣品加載到孔中之前，必須將這些樣品稀釋到足以通過凝膠的程度，而不會(huì)溢出孔。如果由于科學(xué)家忘記稀釋樣品或使用了不適當(dāng)?shù)南♂屢蜃佣箻悠窛舛冗^高，那么碎片對(duì)于孔來說將太大而產(chǎn)生污點(diǎn)。
不良的樣品質(zhì)量也會(huì)造成拖尾現(xiàn)象。例如，被蛋白質(zhì)污染或含鹽過多的DNA樣品可能會(huì)產(chǎn)生拖影。降解或變性的樣品也會(huì)產(chǎn)生較差的結(jié)果，包括條帶弄臟。
凝膠電泳是科學(xué)家觀察消化后的樣品并確定片段大小的絕佳方法。精心準(zhǔn)備凝膠和樣品，可最大程度地減少涂抹的可能性，并產(chǎn)生清晰的條帶，是科學(xué)解釋的理想之選。
