一、注意事項(xiàng)
1. 清洗厚薄兩塊玻片：初次使用需要用酒精棉球擦拭干凈。經(jīng)常使用用自來(lái)水沖洗干凈后，再用單蒸水沖洗，晾干。也可用酒精擦拭。
2. 取合適大小，容器將各液體依次加入，在加AP和TEMED前將玻璃片放入casting frame 做成glass plate sandwich，放在水平桌面上鎖定后，固定在casting stand上，注意垂直放置，壓緊底面的膠條，以防漏液。
二、常見(jiàn)問(wèn)題及解答
1. 兩快玻璃板之間灌膠，膠為什么總是不平？
（1） 你的玻璃洗干凈沒(méi)有？應(yīng)該要洗得非常干凈！
（2） 過(guò)硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對(duì)較多，凝膠凝固過(guò)快也會(huì)膠不平，**多按照分子克隆加倍。
（3） 加完試劑以后沒(méi)有很好的搖勻，導(dǎo)致有些部位的聚合劑濃度過(guò)高，聚合相對(duì)較快造成膠不平。
（4） 稍微注意手法，均勻加入。
（5） 灌膠后應(yīng)該用水或者正丁醇?jí)耗z面或用20%的乙醇封頂（沒(méi)有毒性可以除氣泡，使用效果極好）。戰(zhàn)友小新723認(rèn)為：“**天灌膠后，用乙醇直接壓，待乙醇揮發(fā)完畢后，上面加一層水，第二天電泳用，效果很好。不用正丁醇，乙醇比正丁醇效果要好多了”。
（6） 邊緣膠是不容易聚合完全的，灌完膠后要立即加無(wú)水正丁醇覆蓋，濃度越低的膠越不要使用雙蒸水壓頂，另外還可以在壓頂試劑如正丁醇中添加少許AP來(lái)增加邊緣膠的凝聚強(qiáng)度
（7） 溫度也是影響膠聚合的重要因素，我們有些同學(xué)為了讓膠更快的凝固而把膠放到50度的溫箱，由于受熱不均勻，造成膠聚合不均勻。
2. 膠為什么總是漏？
（1） 每次電泳完后，洗凈玻璃、膠條和其它附件，下次用之前，用75%酒精擦拭玻璃和膠條，能有效防漏，且利于剝膠。
（2） 避免玻璃邊緣（與膠條接觸處）破損很重要，尤其是下面和膠條接觸的地方。
（3） 關(guān)鍵是找一塊很平的桌面，使兩塊玻璃底面非常齊就行了。
（4） 膠條一定要干，跑完電泳后，膠條就放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上晾著。
（5） 下面的膠條注意不要老化，如果有裂紋的話用保鮮膜墊在上面，也可以有效防止漏膠，或者反過(guò)來(lái)用。
（6） 玻璃在使用過(guò)程中容易造成小的缺口，從而導(dǎo)致封條無(wú)法完全密封，裝好架子后，在玻璃底邊上抹上一層薄薄的凡士林就好了，兩邊多點(diǎn)（容易從兩邊漏）這樣就不會(huì)漏了，就算是用了很久的很多小缺口的玻璃都沒(méi)有問(wèn)題，然后轉(zhuǎn)移到
電泳槽的時(shí)候，去掉封條，把底上的凡士林擦干就OK了（注意，一定要擦干凈，尤其是少量進(jìn)入了兩隔玻璃之間空腔的，贏偉凡士林不導(dǎo)電，會(huì)影響第2相的效果的。
（7） 你可以在海綿墊下再墊一些紙，使得它與玻璃貼的更緊密?；蛘咴诓ＡУ撞坑铆傊欠馍稀?/div>
（8） 因?yàn)閮蓧K玻板沒(méi)有放的完全對(duì)齊，底部不在同一個(gè)平面，所以封條封不嚴(yán)，重新對(duì)齊后就不漏了。以后每次只要在水平的桌面上仔細(xì)對(duì)齊兩塊玻板，再夾緊。用手感覺(jué)一下確定在同一平面上后，放到灌膠架并壓在封條上，卡緊。注意兩邊均勻用力，一般不會(huì)再漏。
（9） 先把兩塊玻片放在夾子上，不要加緊，放到架子上，使兩塊玻片的底部對(duì)齊，夾緊兩塊玻片，然后取下再在其下面墊上墊片，這樣一般就不會(huì)漏膠了。但是如果你放了墊片再對(duì)齊玻片底部，或者在桌子上對(duì)其玻片底部然后放到架子上的話，經(jīng)常會(huì)漏膠
3. 條帶跑得比正常的窄？
（1）可能因?yàn)槟z凝的不均勻，聚合的不是很好，灌膠的時(shí)候盡量混勻。
（2）是不是有窄有寬？可能與你拔梳子的時(shí)候有關(guān)，拔梳應(yīng)該迅速，沖洗加樣孔的時(shí)候要小心，以免把上樣帶扭曲；膠配好了用槍吹幾下再灌膠，還有就是要等指示劑跑到兩層膠交界成一線時(shí)，再調(diào)高電壓。
（3）可能是你樣品的問(wèn)題，如果鹽濃度較高，便會(huì)擠壓其它條帶，致使條帶寬窄不一，由于同樣的原因，樣品在凝膠中的速度會(huì)很慢，造成條帶走的較慢，好像與你的預(yù)想不一致。
（4）常見(jiàn)的原因是：每孔上樣量不均勻，應(yīng)確保每孔中上樣量一致。
（5）可能是系統(tǒng)的ph出了問(wèn)題，有可能是你的電極緩沖液，也有可能是凝膠緩沖液，更新緩沖液看看，看是否能成功。
